红笛鲷弧菌病血清流行病学研究方法的建立Establishment of Research Method on Serological Epidemiology of Vibriosis of Lutjanus sanguineus
简贺君,简纪常,吴灶和,鲁义善,张丽敏
摘要(Abstract)：
以红笛鲷Lutjanus sanguineus弧菌病的主要病原菌——溶藻弧菌Vibrio alginolyticus为抗原制备兔抗血清,以辣根过氧化酶标记的羊抗兔血清为酶标二抗,建立了酶联免疫吸附试验检测技术。通过棋盘滴定法测定,得出溶藻弧菌菌悬液的最佳工作浓度为5×108mL-1,兔抗溶藻弧菌血清的最佳稀释度为1∶16000,酶标羊抗兔抗体的最佳稀释度为1∶2000。应用本实验建立的间接双抗体夹心法对红笛鲷进行现场检测,患病红笛鲷特异性抗体的检出率为70%,外观健康红笛鲷的检出率为20%。结果表明,本实验所建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测法可以用于红笛鲷弧菌病的血清流行病学研究,而且可以检测出隐性感染状态下的红笛鲷。
关键词(KeyWords)： 红鳍笛鲷;酶联免疫吸附试验;弧菌病;特异性抗体
基金项目(Foundation): 广东省科技计划项目(2006A20301003)“主要海水养殖鱼类弧菌病流行病学研究”
作者(Author): 简贺君,简纪常,吴灶和,鲁义善,张丽敏
参考文献(References)：
- [1]李永芹,简纪常,吴灶和.红鳍笛鲷弧菌病病原的研究[J].湛江海洋大学学报,2004,24(6):1-5.
- [2]李军,冯娟,刘旭,等.香港地区养殖平鲷的病原菌(溶藻胶弧菌)的研究[J].水产学报,1998,22(3):275-278.
- [3]朱传华,何建国,黄志坚.网箱养殖石斑鱼暴发性溃疡病病原菌分离、鉴定及致病性研究[J].中山大学学报,2000,39(增刊):278-281.
- [4]黄志坚,何建国.鲑点石斑鱼细菌病原的分离鉴定和致病性[J].中山大学学报,2002,41(5):64-67.
- [5]祖国掌,余为一,李槿年.草鱼细菌性败血症的诊断及流行病学调查[J].淡水渔业,2000,30(5):35-37.
- [6]金珊,王国良,赵青松,等.海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的流行病学研究[J].水产科学,2005,24(1):17-19.
- [7]Dixon P F,Hill B J.Rapid detection of fish rhabdoviruses by the enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)[J].Aquaculture,1984,42:1-12.
- [8]余俊红,姚斐,王宝坤,等.应用间接ELISA技术快速检测花鲈病原菌——鳗弧菌[J].高科技通讯,2001(7):23-27.
- [9]Melingen G O,Nilsen F,Wergeland H I.The serum antibody levels in Atlantic salmon(Salmo salar L.)after vaccination with Vibrio salmonicida at different times during the smolting and early post-smolt period[J].Fish&Shellfish Immunology,1995(5):223-235.
- [10]Boulard C.Degradation of bovine C3by serine proteases from parasites Hypoderma lineatum(Diptera,Oestridae)[J].Vet Immunol Immunopathol,1989,20(4):387-398.
- [11]王崇明,杨冰,宋晓玲,等.应用双抗体夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原——创伤弧菌的研究[J].中国水产科学,1999,20(1):30-34.
- [12]林清华.免疫学实验[M].武汉:武汉大学出版社,1999:254-260.
- [13]杜锐,王树志,程业军,等.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鹿布氏杆菌抗体的研究[J].吉林农业大学学报,2002,24(4):103-106.
- [14]王崇明,杨冰,宋晓玲,等.应用双抗夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原——创伤弧菌的研究[J].海洋水产研究,1999,20(1):30-34.
- [15]鄢庆枇,王军,苏永全,等.大黄鱼病原菌——溶藻弧菌的ELISA快速检测研究[J].海洋科学,2001,25(9):47-49.