姚欢,黄郁葱,蔡双虎,鲁义善,蔡小辉,简纪常

• 1:广东海洋大学水产学院
• 2:广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室
• 3:广东高等学校水产经济动物病害控制重点实验室
• 4:广西海洋研究所

摘要(Abstract)：

从患烂尾病眼斑拟石首鱼(Sciaenops ocellatus)的溃疡处分离到一株优势菌So GZ1401,回归感染试验证实该菌是引起烂尾病的病原菌,对眼斑拟石首鱼的半致死量(LD50)为8.6×103 CFU·g~(-1);结合其形态学和生理生化特征及HSP60测序分析,鉴定为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi);利用杯碟法研究其胞外产物性质,结果表明:其胞外产物具有淀粉酶、明胶酶、酪蛋白酶、卵磷脂酶、脂酶活性以及溶血活性,但无脲酶活性。药敏试验表明,该菌株对氟哌酸、恩诺沙星、氟苯尼考和复方新诺明等抗菌药有较高的敏感性。制备哈维氏弧菌灭活疫苗,采用注射和浸泡2种途径免疫眼斑拟石首鱼,测定受免疫鱼的血清抗体效价和疫苗对眼斑拟石首鱼的免疫保护率。结果显示,免疫组血清中的抗体效价水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),注射组和浸泡组的抗体效价最高值分别达718.4和128,哈维氏弧菌攻毒后免疫保护率分别为75.0%~86.7%和46.4%~56.7%。哈维氏弧菌灭活疫苗对眼斑拟石首鱼具有较好的免疫保护性。

关键词(KeyWords)： 眼斑拟石首鱼;烂尾病;病原;哈维氏弧菌;免疫效果

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省海洋经济创新发展区域示范专项(GD2012-B01-004);; 广西海洋生物技术重点实验室开放基金(GLMBT-201404);; 农业部农业公益项目(201203085);; 广东省科技计划项目(2012020800006)

作者(Author): 姚欢,黄郁葱,蔡双虎,鲁义善,蔡小辉,简纪常

参考文献(References)：

• [1]陆彤霞.美国红鱼的生物学特性、人工育苗及病害防治技术[J].海洋渔业,2003,25(1):34-36.
• [2]李凯彬,石存斌,李新辉,等.眼斑拟石首鱼暴发性传染病病原初步研究[J].中国水产科学,2002,9(1):56-59.
• [3]陈偿,胡超群,陈晓燕,等.新发现的红拟石首鱼溃疡病病原海藻施万氏菌的分离和分子鉴定[J].海洋与湖沼,2003,34(1):1-8.
• [4]张继挺,朱文渊,王国良.美国红鱼肾肿大症的病原及其致病性研究[J].宁波大学学报(理工版),2013,26(1):6-11.
• [5]纪荣兴,胡石柳,邹文政,等.美国红鱼“腐皮病”病原的初步研究[J].海洋科学,2003,27(8):1-4.
• [6]沈智华,钱冬,许文军,等.红拟石首鱼海豚链球菌分离、鉴定及致病性研究[J].水生生物学报,2005,29(6):80-85.
• [7]李太武,苏秀榕,丁明进.皱纹盘鲍脓疱病菌——河流弧菌II胞外产物的研究[J].辽宁师范大学学报(自然科学版),1999,22(3):231-235.
• [8]东秀珠,蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册[M].北京:科学出版社,2001:409-410.
• [9]HOLT J G,KRIEG N R,SNEATH P H,et al.Bergey’s manual of determinative bacteriology[M].Ninth Edition.Baltimore:Williams and Wilkins,1994:2350-2361.
• [10]KWOK A Y,WILSON J T,COULTHART M,et al.Phylogenetic study and identification of human pathogenic Vibrio species based on partial Hsp60 gene sequences[J].Canadian Journal of Microbiology,2002,48(10):903-910.
• [11]陈贺,吴灶和,王蓓,等.无乳链球菌灭活疫苗对罗非鱼的免疫效果[J].广东海洋大学学报,2012,32(6):50-56.
• [12]DEVESA S,TORANZO A E,BARJA J L.First report of vibriosis in turbot(Scophthalm usmaximus)cultured in northwestern Spain[M]//Ellis A E.Fish and Shellfish Pathology.New York:Academic Press,1985:131-140.
• [13]LIU P C,LIN J Y,CHUANG W H.Isolation and characterization of pathogenic Vibrio harveyi(V.carchariae)from the farmed marine cobia fish Rachycentron canadum L.with gastroenteritis syndrome[J].World Journal of Microbiology and Biotechnology,2004,20(5):495-499.
• [14]王保坤,余俊红,李筠,等.花鲈弧菌病原菌(哈维氏弧菌)的分离与鉴定[J].中国水产科学,2002,9(1):52-55.
• [15]石亚素,童国忠,薛超波,等.舟山养殖大黄鱼烂尾病中哈氏弧菌的分离鉴定及药敏试验[J].中国卫生检验杂志,2005,15(3):267-269.
• [16]陈献稿,吴淑勤,石存斌,等.斜带石斑鱼病原菌(哈维氏弧菌)的分离与鉴定[J].中国水产科学,2004,11(4):313-317.
• [17]梅冰,周永灿,徐先栋,等.斜带石斑鱼烂尾病病原菌的分离与鉴定[J].热带海洋学报,2010,29(6):118-124.
• [18]覃映雪,池信才,苏永全,等.网箱养殖青石斑鱼的溃疡病病原[J].水产学报,2004,28(3):297-302.
• [19]范文辉,黄倢,王秀华,等.养殖大菱鲆溃疡症病原菌的分离鉴定及系统发育分析[J].微生物学报,2005,45(5):665-670.
• [20]张凤萍,彭志兰,张健,等.鮸鱼弧菌病病原菌(哈维氏弧菌)的分离与鉴定[J].微生物学报,2010,50(3):304-309.
• [20]杨少丽,王印庚,董树刚.海水养殖鱼类弧菌病的研究进展[J].海洋水产研究,2005,26(4):75-83.
• [21]LEE K K,LIU P C,Chuang W H.Pathogenesis of gastroenteritis caused by Vibrio carchariae in cultured marine fish[J].Marine Biotechnology,2002,4(3):267-277.
• [22]吴后波,潘金培.病原弧菌的致病机理[J].水生生物学报,2003,27(4):422-426.
• [23]AUSTIN B,ZHANG X H.Vibrio harveyi:a significant pathogen of marine vertebrates and invertebrates.Letters in Applied Microbiology,2006,43(2):119-124.
• [24]SAEED M O.Association of Vibrio harveyi with mortalities in cultured marine fish in Kuwait[J].Aquaculture,1995,136:21-29.
• [25]LIU P C,LEE K K.Cysteine protease is a major exotoxin of pathogenic luminous Vibrio harveyi in the tiger prawn,Penaeus monodon[J].Letters in Applied Microbiology,1999,28(6):428-430.
• [26]白方方,张晓华.哈维氏弧菌密度感应系统对几种胞外酶的活性影响[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2010,40(6):91-95.
• [27]写腊月,胡琳琳,房文红,,等.海水养殖源弧菌耐药性调查与分析[J].海洋渔业,2011,33(4)::442-446.
• [28]王丹,隋倩,赵文涛,等.中国地表水环境中药物和个人护理品的研究进展[J].科学通报,2014,59(9):743-751.
• [29]沈锦玉,许文军,尹文林,等.哈维氏弧菌灭活疫苗在养殖大黄鱼中的应用与评价[J].大连海洋大学学报,2010,25(3):210-213.
• [30]毛芝娟,楼丹,杨波,等.用灭活哈维弧菌菌苗浸泡免疫大黄鱼的研究[J].华中农业大学学报,2004,23(3):326-330.