豆伟,王梅芳,郑娇,余祥勇

• 1:广东海洋大学水产学院

摘要(Abstract)：

将马氏珠母贝新鲜精液和精子水浴致死精液配制含有不同精子死亡率(0%、20%、40%、60%、80%)的5浓度梯度检测样品,并作为理论精子死亡率,采用二乙酰荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)-碘化丙啶(Propidium iodide,PI)双荧光复染法检测精子存活率和质膜完整性。结果表明,FDA和PI能有效区分活精子和死精子,活精子发出绿色荧光,死精子发出红色荧光。各样品实测精子死亡率和理论死亡率之间呈极显著正相关,相关系数r=0.99(p<0.01)。FDA-PI双荧光复染法检测马氏珠母贝精子存活率,灵敏度高,重复性好,准确有效。

关键词(KeyWords)： 马氏珠母贝;精子;活精率;二乙酰荧光素;碘化丙锭

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 公益性行业(农业)科研专项(200903028);; 广东省科技计划项目(2010B031300011)

作者(Author): 豆伟,王梅芳,郑娇,余祥勇

参考文献(References)：

• [1]蔡英亚,张英,魏若飞.贝类学概论[M].上海:上海科学技术出版社,1995:209-210.
• [2]沈亦平,张锡元.合浦珠母贝精子发生过程的超微结构观察[J].武汉大学学报(自然科学版),1993,(6):123-126.
• [3]余祥勇,王梅芳,陈钢荣,刘雅靖,张春芳.马氏珠母贝精子低温保存主要影响因素的研究[J].华南农业大学学报,2005,26(3):96-99.
• [4]王梅芳,余祥勇,刘永,毛勇.于菲菲.马氏珠母贝精子的超低温保存[J].水产学报,2006,30(2):170-174.
• [5]Krogenes A,Andersen BK,Hafne AL,Engeland E.Membranealterations in bull spermatozoa after freezing and thawing and afterinvitro fertilization[J].Acta Veterinary Scandinavia,1994,35(1):17-26.
• [6]徐立滨,霍立军,于浩,高飞.猪精液中精子质量的检测[J].黑龙江畜牧兽医,2005(5):35-36.
• [7]白修云,王有柱,李向臣,关伟军.哺乳动物精子质量检测原理及方法[J].中国畜牧兽医,2007,34(7):24-26.
• [8]刘奕,纪锋,谷伟,龚丽,郑金霞,杨翟平,王炳谦.荧光染色法检测虹鳟精子质量[J].水产学杂志,2010,23(1):33-34.
• [9]Jose M,Coco-Martin,Jan W.Oberink.Tiny A.M.van der Velden-deGroot.and E.Coon.Beu-very.Viability measurements of hybridomacells in suspension cultures[J].Cytotechnology,1992,8(1):57-64.
• [10]庄丽伟,许厚强,隋世燕,王海娜,张勇,陈祥,主性.FDA-PI荧光荧光双色法快速评价小鼠桑葚胚活力[J].四川动物,2009,28(2):209-211.
• [11]赵洪鑫,袁瑶,华敏敏,张慧琴,施惠娟.用Transgreen/PI荧光复染法检测精子的存活率[J].中国男科学杂志,2008,2(4):1-4.