广东海洋大学学报

2010, v.30(04) 17-21

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鲶爱德华氏菌间接酶联免疫快速检测法的建立
Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) for Rapid Detection of Edwardsiella ictaluri

李重实,李强,刘海燕,叶仕根,李华

摘要(Abstract):

用鲶爱德华氏菌兔抗血清作为一抗,碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗兔IgG作为酶标二抗,建立黄颡鱼"红头病"病原菌—鲶爱德华氏菌的间接酶联免疫(ELISA)快速检测法,并优化检测条件。抗原最佳包被浓度为107/mL,一抗工作的最佳稀释度为1∶211,病原菌的检测灵敏度为105/mL,交叉反应实验证明该方法特异性强,与迟钝爱德华氏菌、弧菌等13种标准菌株无交叉。应用上述技术对人工感染发病鱼中分离的优势菌进行检测,结果表明阳性检出率为80%;对自然发病黄颡鱼体内分离获得的20株优势菌检测结果表明,12株菌为鲶爱德华氏菌。

关键词(KeyWords): 鲶爱德华氏菌;酶联免疫吸附实验(ELISA);黄颡鱼;“红头病”;多克隆抗体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家十一五科技支撑项目(2006BAD09A01);; 辽宁省海洋与渔业厅项目(201005);; 辽宁省教育厅高等学校科研计划(2008143);; 辽宁省自然科学基金(20032097)

作者(Author): 李重实,李强,刘海燕,叶仕根,李华

参考文献(References):

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