林海生,康佳傲,李菲,谢绍河,曾堉斯,秦小明,曹文红,陈忠琴,郑惠娜

• 1:广东海洋大学食品科技学院
• 2:广东省水产品加工与安全重点实验室/广东普通高等学校水产品深加工重点实验室/国家贝类加工技术研发分中心(湛江)/南海生物资源开发与利用协同创新中心
• 3:广东绍河珍珠有限公司

摘要(Abstract)：

【目的】筛选和鉴定三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）珍珠层蛋白酶解产物中的酪氨酸酶抑制肽，为美白肽的研究与开发提供依据。【方法】以三角帆蚌珍珠层粉为原料，基于其蛋白组成特性，采用物理改性和可控酶解技术制备珍珠层活性肽（Peptides from nacre powder,P-NP），通过测定其2,2′-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）和1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（DPPH）的清除能力、酪氨酸酶抑制活性以及对紫外线B(UVB)辐照损伤人永生化角质形成细胞（HaCaT）的影响，探究其体外活性。采用液质联用技术（LC-MS/MS）和分子对接技术从P-NP中鉴定并筛选出三角帆蚌酪氨酸酶抑制肽，并进行固相合成和体外活性验证。【结果】P-NP的ABTS和DPPH自由基清除效果较佳，肽质量浓度为1.00、14.00 mg/mL时，两者清除率分别为41.58%和11.23%;P-NP的酪氨酸酶活性抑制能力良好，其半抑制浓度（IC_(50)）值为7.51 mg/mL。P-NP质量浓度在83.22μg/mL时，显著提高UVB损伤HaCaT细胞的生长活力（P <0.05）。P-NP经LC-MS/MS鉴定后筛选出相对分子质量集中在500～1 000的61条肽序列作为候选肽库，分子对接筛选出3条潜在的酪氨酸酶抑制肽，其主要通过氢键与酪氨酸酶活性中心及其以外的位点相结合，从而达到抑制其活性的作用。其中，Tyr-Pro-Asn-Pro-Tyr(YPNPY)对酪氨酸酶抑制作用最强，IC_(50)为（0.545±0.028）mmol/L，主要抑制类型为竞争型抑制。【结论】三角帆蚌珍珠层活性肽具有良好的清除自由基和酪氨酸酶抑制活性。

关键词(KeyWords)： 三角帆蚌;珍珠层粉;酪氨酸酶抑制;活性肽;分子对接

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系项目（CARS-49）;; 广东省现代农业产业技术体系创新团队项目（2021KJ146）;; 广东省大学生创新创业训练计划项目（S202310566017）;; 广东海洋大学贝类高值化加工利用创新团队（CXTD2021004）

作者(Author): 林海生,康佳傲,李菲,谢绍河,曾堉斯,秦小明,曹文红,陈忠琴,郑惠娜

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