不同条件延缓未受精卵激活对鱼类细胞电融合的影响Effect on Fish Cell Electrofusion by Delayed Activation Time for Unfertilized Oocytes under Different Conditions
吴滟,傅洪拓,龚永生,何新龙,熊贻伟
摘要(Abstract):
泥鳅未受精卵先在合成卵巢液、郝氏液中分别浸泡15、20、30min,然后再受精孵化,统计发育情况,结果表明,合成卵巢液可有效延缓未受精卵遇水后被激活的时间,郝氏液对延缓未受精卵被激活也有一定作用,但效果比合成卵巢液差。用合成卵巢液配制不同浓度胰酶处理受体卵进行细胞电融合实验,胰酶质量浓度为5 mg/mL时,融合卵发育至囊胚期的比例比对照组(郝氏液)高2%,统计分析表明该差异是显著的(P<0.05);但发育至原肠期及孵出期的比例则与对照组无显著差异。胰酶质量浓度为2和1 mg/mL时,融合卵发育到各阶段的比例均低于对照组,统计分析表明两者的差异是显著的(P<0.05)。研究表明,溶液种类、胰酶浓度等对电融合卵的发育有明显的影响,但延缓受体卵的激活时间并不能提高电融合卵的出苗率。用郝氏液配制的2 mg/mL的胰酶溶液处理受体卵,可获得较高比例的融合鱼。
关键词(KeyWords): 细胞电融合;鱼类未受精卵;激活;胰酶;泥鳅
基金项目(Foundation): 瑞典国际自然科学基金(IFS)资助(A/2646-1);; 973协作(G2000016109)
作者(Author): 吴滟,傅洪拓,龚永生,何新龙,熊贻伟
参考文献(References):
- [1]Senda M,Takeda J,Abe S,et al.Induction of cell fusion ofplant protoplasts by electrical stimulation[J].Plant and cellphysiology,1979,20:1441-1443.
- [2]Zimmermann U.Electrical breakdown electroper meabilizationand electrofusion[J].Rev Physiol Biochem Pharmacol,1986,105:175-256.
- [3]Zimmermann U,Vienken J.Electric field-induced cell-to-cellfusion[J].Journal of membrane boplogy,1982,67:165-182.
- [4]刘沛霖,易泳兰,刘汉勤,等.鱼类细胞电融合的初步研究[J].水生生物学报,1988,12(1):94-96.
- [5]易泳兰,刘沛霖,刘汉勤,等.鱼类囊胚细胞与卵的电融合[J].水生生物学报,1988,12(2):189-192.
- [6]Fu Hongtuo,Wu Chingjiang.Nuclear transfer in loach(Pa-ramisgurnus dabryanusSauvage)by ceil-to-cell electrofusion[J].Aquaculture research,2001,32:267-275.
- [7]Bongers A B J,King T J.Androgenesis in common carp usingUV irradiation in synthetic ovarian fluid and heat shocks[J].Aquaculture,1994,122:119-132.
- [8]石连玉,尹洪滨,范兆廷,等.鱼类培养的体细胞与成熟卵的电融合技术研究[J].水产学杂志,1993,6(1):37-40.