广东海洋大学学报

2019, v.39(01) 30-34

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马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测
Construction and Self-activation Detection of Yeast Two-Hybrid System for α2-Macroglobulin Receptor-Binding Domain of Pinctada martensii

曹丹煜;陈刚;张健东;汤保贵;周晖;施钢;潘传豪;黄建盛;王忠良;

摘要(Abstract):

【目的】构建马氏珠母贝(Pinctada martensii)酵母双杂交文库及α2-巨球蛋白受体结合区诱饵载体,检测其在酵母细胞中的自激活作用。【方法】利用CLONTECH SMART技术及酵母体内同源重组的方法构建马氏珠母贝酵母双杂交cDNA文库;将α2-巨球蛋白受体结合区克隆至pGADT7载体,并转化AH109酵母感受态细胞,检测自激活作用。【结果与结论】酵母双杂交文库容量为1.11×107克隆/mL,重组率大于90%;菌落PCR结果显示,插入片段长度均在500bp以上;诱饵质粒成功转化至AH109菌株,且无自激活性,符合文库构建指标,可用于文库筛选。

关键词(KeyWords): 马氏珠母贝;α2-巨球蛋白;酵母双杂交;自激活检测

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省省级科技计划项目(2015A020209169);; 国家自然科学基金项目(31202023);; 广东海洋大学优秀青年骨干教师特别资助计划项目(GDOU2015050214)

作者(Author): 曹丹煜;陈刚;张健东;汤保贵;周晖;施钢;潘传豪;黄建盛;王忠良;

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参考文献(References):

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