许开航,王梅芳,余祥勇,于非非,林丹丹,郑煜东,李启辉,万绮娟,陈荣娴

• 1:广东海洋大学水产学院
• 2:华南农业大学海洋学院

摘要(Abstract)：

【目的】更好地了解企鹅珍珠贝性别转换机制。【方法】RACE-PCR技术克隆企鹅珍珠贝Sox9基因cDNA的全长序列,分析其理化性质和进化地位;荧光定量PCR技术分析Sox9基因在各组织及不同时期性腺中的表达特征。【结果与结论】Sox9基因cDNA序列全长2 267 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 410 bp,编码469个氨基酸。氨基酸序列比对显示企鹅珍珠贝Sox9基因与黑蝶真珠蛤(Pinctada margaritifera)和马氏珠母贝(Pinctada fucata)有高度同源性(>81%)。Sox9在企鹅珍珠贝各组织中均有表达,在足中表达量最高(P<0.05),精巢中其次;Sox9在成熟期精巢检测到最大表达量(P<0.05),在发育早期精巢、退化期精巢和成熟期卵巢中表达量较低,其中发育早期卵巢表达量最低(P<0.05)。

关键词(KeyWords)： 企鹅珍珠贝;Sox9;PCR;基因克隆

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省科技发展专项(2016A020210115);; 广东省渔港建设和渔业发展专项(B201601-Z08,Z2014005);; 广东海洋大学博士科研启动项目(E15041);广东海洋大学创新强校重点课题(GDOU2016050248)

作者(Author): 许开航,王梅芳,余祥勇,于非非,林丹丹,郑煜东,李启辉,万绮娟,陈荣娴

参考文献(References)：

• [1]于非非,王梅芳,桂建芳,等.马氏珠母贝Sox11基因的克隆及时序表达模式分析[J].水生生物学报,2016,40(1):71-75.
• [2]SINCLAIR A H,BERTA P,PALMER M S,et al.A gene from the human sex-determining region encodes a protein with homology to a conserved DNA-binding motif[J].Nature,1990,346(6281):240-244.
• [3]SEKIDO R,LOVELLBADGE R.Sex determination involves synergistic action of SRY and SF1 on a specific Sox9 enhancer[J].Nature,2008,453(7197):930-934.
• [4]FOSTER J W,DOMINGUEZ-STEGLICH M A,GUIOLI S,et al.Campomelic dysplasia and autosomal sex reversal caused by mutations in an SRY-related gene[J].Nature,1994,372(6506):525-530.
• [5]BI W,DENG J M,ZHANG Z,et al.Sox9 is required for cartilage formation[J].Nature Genetics,1999,22(1):85-89.
• [6]BARRIONUEVO F,SCHERER G.SOX E genes:Sox9and Sox8 in mammalian testis development[J].International Journal of Biochemistry&Cell Biology,2010,42(3):433-436.
• [7]QIN Y,BISHOP C E.Sox9 is sufficient for functional testis development producing fertile male mice in the absence of Sry[J].Human Molecular Genetics,2005,14(9):1221-1229.
• [8]QIN Y,KONG L K,POIRIER C,et al.Long-range activation of Sox9 in Odd Sex(Ods)mice[J].Human Molecular Genetics,2004,13(12):1213-1218.
• [9]TROWE M O,SHAH S,PETRY M,et al.Loss of Sox9 in the periotic mesenchyme affects mesenchymal expansion and differentiation,and epithelial morphogenesis during cochlea development in the mouse[J].Developmental Biology,2010,342(1):51-62.
• [10]SAEGER B,BARRIONUEVO F,SCHERER G,et al.09-P050 Sox E genes in mouse inner ear development[J].Mechanisms of Development,2009,126(Suppl):S165-S165.
• [11]CHEW L J,GALLO V.The Yin and yang of Sox proteins:activation and repression in development and disease[J].Journal of Neuroscience Research,2009,87(15):3277-3287.
• [12]LIOUBINSKI O,MüLLER M,WEGNER M,et al.Expression of Sox transcription factors in the developing mouse pancreas[J].Developmental Dynamics An Official Publication of the American Association of Anatomists,2003,227(3):402-408.
• [13]秦宏敏,韩会峰,沙广钊,等.软骨肉瘤相关基因Sox9(si RNA)表达质粒的构建鉴定以及对肿瘤细胞生长和凋亡的影响[J].中国肿瘤临床,2008,35(3):158-161.
• [14]蔡英亚,张英,魏若飞.贝类学概论[M].上海:上海科学技术出版社,1995:209-210.
• [15]余祥勇,王梅芳,梁飞龙,等.企鹅珍珠贝不同组织同工酶表达的差异[J].中国水产科学,2005,12(2):201-206.
• [16]符韶,邓陈茂,梁飞龙,等.企鹅珍珠贝人工养殖及育珠的研究[J].广东海洋大学学报,2007,27(1):34-37.
• [17]潘珍妮,余祥勇,王梅芳,等.企鹅珍珠贝Dmrt2基因的克隆及表达分析[J].海洋科学,2017,41(10):117-124.
• [18]梁少帅,于潇含,杨丹丹,等.栉孔扇贝sox9基因的c DNA克隆及其在不同发育时期性腺中的表达特征[J].中国水产科学,2017,24(6):1184-1192.
• [19]潘晓艳,郑哲,田荣荣,等.马氏珠母贝组蛋白H3基因的克隆与表达特性分析[J].基因组学与应用生物学,2015,34(7):1421-1428.
• [20]雷超,郑哲,王庆恒,等.马氏珠母贝载脂蛋白-2基因的克隆与表达分析[J].广东海洋大学学报,2017,37(3):1-7.
• [21]MEYER J.Autosomal sex reversal and campomelic dysplasia are caused by mutations in and around the SRY-related gene Sox9[J].Cell,1994,79(6):1111-1120.
• [22]WAGNER T,WIRTH J,MEYER J,et al.Autosomal sex reversal and campomelic dysplasia are caused by mutations in and around the SRY-related gene Sox9[J].Cell,1994,79(6):1111-1120.
• [23]李讨讨,马友记,卢曾奎,等.Sox9基因在绵羊不同组织中的表达及其在睾丸中的定位[J].农业生物技术学报,2016,24(10):1529-1535.
• [24]雷薇薇.Sox9和P450arom基因在早期雌、雄鸡胚性腺中的表达[D].武汉:华中农业大学,2011.
• [25]陈建华,何毛贤,牟幸江,等.金钱鱼Sox9 c DNA克隆及其表达分析[J].动物学杂志,2015,50(1):93-102.
• [26]王莉,孙伟,储经乾,等.中华鳖Sox9基因在胚胎期性腺中的表达模式及在性逆转中的表达变化[J].水产学报,2014,38(9):1286-1293.
• [27]陈金平,袁红梅,王斌,等.史氏鲟Sox9基因c DNA的克隆及在早期发育过程不同组织中的表达[J].动物学研究,2004,25(6):527-533.
• [28]聂振昌.大鲵Sox9基因的克隆与表达[D].长沙:湖南农业大学,2010.
• [29]梁清仪,王心仪,孙冬捷,等.两个Sox9基因在斑马鱼胚胎发育和成体性腺中的动态表达特征[J].山东农业科学,2014(7):20-24.
• [30]SEYMOUR P A,FREUDE K K,DUBOIS C L,et al.A dosage-dependent requirement for Sox9 in pancreatic endocrine cell formation[J].Developmental Biology,2008,323(1):19-30.
• [31]黄超敏.四种海水双壳贝类腹足和足丝的比较解剖研究[D].海口:海南大学,2011。