广东海洋大学学报

2021, v.41(01) 72-80

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基于PCR和TOF-MS海洋源产脂肽芽孢杆菌筛选
Screening of Bacillus spp.Producing Lipopeptide from Marine Environment Based on PCR and TOF-MS

邓旗;花梅芳;杨秀文;孙力军;蒲月华;王雅玲;廖建萌;刘颖;房志家;

摘要(Abstract):

【目的】准确高效分离红树林等海洋环境中产脂肽芽孢杆菌。【方法】将前期从红树林环境筛出具有抗菌活性的12株芽孢菌株作为研究菌株,采用溶血活性及排油作用对其中的可能产脂肽菌株进行初步筛选,并基于脂肽合成酶基因PCR扩增法对脂肽合成酶基因携带菌复筛,采用飞行时间质谱(TOF-MS)对所产脂肽进行鉴定。【结果】初步发现6株芽孢杆菌具有溶血活性,其中HY-5、HY-4和HN-9这3株具有排油能力,油层透明圈的直径分别为45、32和3 mm。PCR扩增检测到HY-5含有iturin、surfactin和bacillomycin D合成酶基因,HY-4含有iturin、surfactin合成酶基因,HN-9含有iturin合成酶基因。TOF-MS检测到HY-5和HY-4的发酵液含surfactin、iturin和bacillomycin 3种脂肽,HN-9的发酵液只含iturin。【结论】基于PCR与TOF-MS为核心的级联技术,建立一种海洋源脂肽产生菌快速筛选以及脂肽谱快速鉴定的方法,解决海洋源芽孢杆菌在常规培养基难合成脂肽造成的漏筛情况。

关键词(KeyWords): 海洋;脂肽;PCR扩增;芽孢杆菌;质谱

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东海洋大学科研启动经费资助项目(R19050);; 广东省现代农业产业共性关键技术研发创新团队建设项目-水产品质量安全与环境协调关键技术团队(2019KJ151);; 广东省大学生创新项目(S202010566021)

作者(Author): 邓旗;花梅芳;杨秀文;孙力军;蒲月华;王雅玲;廖建萌;刘颖;房志家;

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