哈维氏弧菌可视化LAMP快速检测方法的建立及应用Establishment and Application of Rapid Visual LAMP Method for Detection of Vibrio harveyi
李涛,周永灿,曹贞洁,孙云
摘要(Abstract):
【目的】为加强对哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的早期快速诊断和筛查,探究一种快速检测方法。【方法】以哈维氏弧菌外膜通道蛋白基因Toic为靶基因,以钙黄绿素为检测结果指示剂,通过对反应体系、反应时间和温度进行优化,并检测其特异性和灵敏度,建立一种针对哈维氏弧菌的可视化环介导等温基因扩增(LAMP)检测方法。【结果】该方法的检测时间最快为35 min,灵敏度为100 fg/mL,特异性强,与8种弧菌及金黄色葡萄球菌均无交叉反应。实用性检测结果显示,该方法可准确并特异性地检测到鱼体组织中感染的哈维氏弧菌。【结论】建立一种设备简单、操作简单、反应快速、特异性强、灵敏度高、结果可视化的哈维氏弧菌LAMP快速检测方法,且适用于石斑鱼(Epinephelus)感染哈维氏弧菌的早期快速诊断,为进一步推广该技术在石斑鱼及其他水生动物哈维氏弧菌感染监测中的现场大规模应用提供技术支撑。
关键词(KeyWords): 环介导等温扩增;哈维氏弧菌;Toic;快速检测;石斑鱼
基金项目(Foundation): 海南省重点研发计划(ZDYF2022XDNY192);; 海南省重大科技计划(ZDKJ2021016)
作者(Author): 李涛,周永灿,曹贞洁,孙云
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