孙瑞坤,章超桦,曾少葵,秦小明,曹文红,高加龙,郑惠娜

• 1:广东海洋大学食品科技学院
• 2:广东省水产品加工与安全重点实验室
• 3:广东普通高等学校水产品深加工重点实验室
• 4:国家贝类加工技术研发分中心(湛江)

摘要(Abstract)：

【目的】优化方格星虫(Sipunculus nudus L.)酶解工艺条件,探讨其酶解液对细胞免疫活性的影响。【方法】在确定实验用酶和单因素实验基础上,利用响应面设计建立数学模型,以水解度为响应值,进行3因素3水平的响应面分析,得到最适酶解条件。以小鼠脾淋巴细胞的增殖、小鼠腹腔巨噬细胞生成NO量和吞噬能力来评价酶解液对免疫细胞的促进作用。【结果】以动物水解蛋白酶和风味蛋白酶组合用酶效果最佳,方格星虫酶解的适宜条件为pH 7.0、加酶量5 000 U/g、液料比3∶1,55℃酶解5.2 h,其水解度为38.92%;以此条件得到的酶解液进行实验,酶解液质量浓度为0.9 mol/mL时,小鼠脾淋巴细胞的增殖率为30.57%,小鼠腹腔巨噬细胞生成NO能力为56.2μmol/L,吞噬能力D(540 nm)值均明显高于阳性对照组(P<0.01)。【结论】方格星虫酶解液对细胞免疫具有促进作用。

关键词(KeyWords)： 方格星虫;酶解;响应面分析;免疫调节

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省教育厅创新强校工程项目(2014GKXM047);; 广东普通高等学校水产品高值化加工与利用创新团队项目(GDOU2016030503);; 2016年广东省应用型科技研发专项资金项目(2016B020235002)

作者(Author): 孙瑞坤,章超桦,曾少葵,秦小明,曹文红,高加龙,郑惠娜

参考文献(References)：

• [1]李凤鲁,庆兰,贵田,等.中国沿海方格星虫属(星虫动物门)的研究[J].青岛海洋大学学报,1990,20(1):93-99.
• [2]BASSIT R A,SAWADA L A,BACURAU R F,et al.The effect of BCAA supplementation upon the immune response of triathletes[J].Medicine&Science in Sports&Exercise,2000,32(7):1214-1219.
• [3]ZHANG Q,DONG L F,TONG T,et al.Polysaccharides in Sipunculus nudus:extraction condition optimization and antioxidant activities[J].Journal of Ocean University of China,2017,16(1):74-80.
• [4]李珂娴,沈先荣,何颖,等.方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响[J].中国海洋药物,2012,31(1):46-49.
• [5]ZHANG C X,DAI Z R,CAI Q X.Anti-inflammatory and anti-nociceptive activities of Sipunculus nudus L.extract[J].Journal of Ethnopharmacology,2011,137(3):1177-1182.
• [6]LI N,SHEN X R,LIU Y M,et al.Isolation,characterization,and radiation protection of Sipunculus nudus L.polysaccharide[J].International Journal of Biological Macromolecules,2016,83:288-296.
• [7]SU J,JIANG L L,WU J N,et al.Anti-tumor and anti-virus activity of polysaccharides extracted from Sipunculus nudus(SNP)on Hepg2.2.15[J].International Journal of Biological Macromolecules,2016,87:597-602.
• [8]李江峰,葛卫红,沈先荣,等.星虫多糖抗疲劳作用实验研究[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(23):212-215.
• [9]蒋定文,沈先荣,贾福星,等.海洋星虫提取物的营养分析及免疫调节作用的初步观察[J].中国生化药物杂志,2004,25(2):96-97.
• [10]张桂和,赵谋明,巫光宏.方格星虫酶解物成分分析及其抗氧化作用[J].食品与生物技术学报,2007,26(3):80-84.
• [11]朱银玲,李思东,方富永.方格星虫多肽的酶解法制备工艺优化与抗氧化作用研究[J].化学通报,2012,75(7):642-647.
• [12]中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.5-2016.食品中蛋白质的测定方法[S].北京:中国标准出版社,2016:1-7.
• [13]王永华.食品分析[M].北京,中国轻工业出版社,2012.
• [14]KLIMETZEK V,REMOLD H G.The murine bone marrow macrophage,a sensitive indicator cell for murine migration inhibitory factor and a new method for their harvest[J].Cellular Immunology,1980,53(2):257-266.
• [15]李婉,曹文红,章超桦,等.牡蛎酶解产物的组成特点及其体外免疫活性[J].食品工业科技,2017,38(16):35-42.
• [16]陈海燕,郑惠娜,曹文红,等.响应面法优化波纹巴非蛤肌肉蛋白酶解工艺条件[J].食品工业科技,2016,37(15):218-224.
• [17]李侠,张利宽,刘春萌,等.响应面法优化荞麦蛋白酶解工艺[J].食品科学,2012,33(22):145-148.
• [18]杨小军,左伟勇,陈伟华,等.灌喂大豆蛋白胃蛋白酶酶解物对大鼠免疫功能的影响[J].畜牧兽医学报,2005,36(4):348-351.
• [19]YANG R Y,ZHANG Z F,PEI X R,et al.Immunomodulatory effects of marine oligopeptide preparation from Chum Salmon(Oncorhynchusketa)in mice[J].Food Chemistry,2009,113(2):464-470.
• [20]何小庆.波纹巴非蛤活性肽的酶法制备及其免疫活性的研究[D].湛江:广东海洋大学,2014.
• [21]邓志程.马氏珠母贝全脏器免疫活性肽的制备及其免疫活性的研究[D].湛江:广东海洋大学,2015.