马氏珠母贝载脂蛋白-2基因的克隆与表达分析Molecular Characterization and Expression Analysis of Pm-ApoL2 Gene from Pinctada fucata martensii
雷超,郑哲,王庆恒,黄荣莲,邓岳文,李俊辉
摘要(Abstract):
以RACE技术克隆获得马氏珠母贝载脂蛋白-2(Pm-ApoL2)基因cDNA全长序列,以传统萃取法提取黄色与白色闭壳肌个体的类胡萝卜素,以荧光定量技术检测Pm-ApoL2基因在各个组织中的表达量及黄与白闭壳肌个体的Pm-ApoL2表达量。结果表明,Pm-ApoL2基因cDNA序列全长1 328 bp,开放阅读框(ORF)长705 bp,编码234个氨基酸,5′非翻译区(5′UTR)长342 bp,3′UTR长281 bp。Pm-ApoL2在肝胰腺中表达量最高,其后依次是外套膜、鳃、闭壳肌,其中肝胰脏表达量显著大于其它3个组织(P<0.05)。黄、白色闭壳肌个体之间的类胡萝卜素含量和Pm-ApoL2的表达量都存在显著性差异(P<0.05),且二者的类胡萝卜素含量与Pm-ApoL2表达量呈显著正相关。Pm-ApoL2基因为马氏珠母贝类胡萝卜素代谢候选基因。
关键词(KeyWords): 马氏珠母贝;载脂蛋白2;基因克隆;基因表达;类胡萝卜素含量
基金项目(Foundation): 国家自然基金项目(31372626);; 广东省教育厅项目(GDOU2013050211)
作者(Author): 雷超,郑哲,王庆恒,黄荣莲,邓岳文,李俊辉
参考文献(References):
- [1]靳青,毕宇霖,刘晓牧,等.类胡萝卜素代谢及功能研究进展[J].动物营养学报,2014,26(12):3561-3571.
- [2]李宁.虾夷扇贝橘红色闭壳肌产生的原因及其在育种中的应用[D].青岛:中国海洋大学,2009.
- [3]高前欣.水产动物中类胡萝卜素的生理功能[J].中国饲料,2005(11):29-30,34.
- [4]郑怀平.华贵栉孔扇贝“南澳1号”新品系培育的研究进展[C]//中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第九次会员代表大会暨第十五次学术讨论会会议摘要集.广州:中国动物学会贝类学分会,2011.
- [5]张洪宽,刘合露,罗刚,等.动物类胡萝卜素代谢的分子研究进展[J].中国农学通报,2015,31(1):247-251.
- [6]陈丽.山羊和黄牛肠道内环境对β-胡萝卜素加氧酶活性影响[D].南京:南京农业大学,2004.
- [7]KIEFER C,SUMSER E,WERNET M F,et al.A class B scavenger receptor mediates the cellular uptake of carotenoids in Drosophila[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2002,99(16):10581-10586.
- [8]ALLEN P C.Effect of Eimeria acervulina infection on chick(Gallus domesticus)high density lipoprotein composition[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Comparative Biochemistry,1987,87(2):313-319.
- [9]王炜.家蚕黄红茧系茧色形成机理研究[D].重庆:西南大学,2014.
- [10]陈雪欣,雷超,彭慧湃,等.马氏珠母贝载脂蛋白基因Pm-APOL3克隆、表达量与类胡萝卜素含量相关分析[J].基因组学与应用生物学,2016,35(7):1707-1714.
- [11]雷超,贝伟烈,郑哲,等.马氏珠母贝B型清道夫受体Pm SR-B基因克隆与表达性分析[J].广东海洋大学学报,2017,37(1):7-14.
- [12]刘合露.华贵栉孔扇贝橙色闭壳肌个体富集类胡萝卜素原因的初步研究[D].汕头:汕头大学,2011.
- [13]焦钰,田群莉,杜晓东,等.马氏珠母贝LST8基因c DNA的分子特征及表达分析[J].基因组学与应用生物学,2014,33(1):10-15.
- [14]VANHOLLEBEKE B,PAYS E.The function of apolipoproteins L[J].Cellular and Molecular Life Sciences CMLS,2006,63(17):1937-1944.
- [15]王炜.家蚕黄红茧系茧色形成机理研究[D].重庆:西南大学,2014.
- [16]KOMATSU M,ANDO S.Isolation of crustacean egg yolk lipoproteins by differential density gradient ultracentrifugation[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Comparative Biochemistry,1992,103(2):363-368.
- [17]GREENE C M,WATERS D,CLARK R M,et al.Plasma LDL and HDL characteristics and carotenoid content are positively influenced by egg consumption in an elderly population[J].Nutrition&Metabolism,2006,3:6.
- [18]李业国,周光宏,高峰,等.类胡萝卜素在动物体内的生理功能及其吸收代谢研究进展[J].畜牧与兽医,2005,37(9):58-61.
- [19]TSUCHIDA K,ARAI M,TANAKA Y,et al.Lipid transfer particle catalyzes transfer of carotenoids between lipophorins of Bombyx mori[J].Insect Biochemistry and Molecular Biology,1998,28(12):927-934.
- [20]薛峰,李晨,潘思轶.动物组织中类胡萝卜素分析、分布的研究进展[J].中国粮油学报,2011,26(5):122-128.
- [21]吴小芬,雷超,陈思曼,等.马氏珠母贝养殖群体两种规格个体的类胡萝卜素含量比较[J].广东海洋大学学报,2016,36(1):31-34.