唐慧芳,张瀛,房志家,孙力军,刘颖

• 1:广东海洋大学食品科技学院//广东省水产品加工与安全重点实验室//水产品深加工广东普通高等学校重点实验室

摘要(Abstract)：

【目的】分析海洋动物肠道中抗氧化活性乳酸菌的多样性,并对活性菌株胞外与胞内代谢物清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力进行测定。【方法】采用溶钙圈分离培养技术和DPPH自由基清除法,从湛江海域6种海洋动物肠道中分离活性乳酸;通过构建16S rDNA基因序列系统发育树,分析其多样性;利用DPPH自由基清除法,测定其抗氧化活性。【结果】共分离得到16株抗氧化活性乳酸菌,分属于细菌域厚壁菌门(Firmicutes)的4个科(Leuconostocaceae,Streptococcaceae,Lactobacillaceae,Enterococcaceae)、6个属(Weissella,Pediococcus,Leuconostoc,Lactococcus,Lactobacillus,Enterococcus),其中除菌株zy-3、LY-87、ZH-54的16S r DNA基因序列与数据库EzBioCloud中的模式菌相似性100%外,其余13株活性菌株与模式菌存在一定的遗传差异(97.42%～99.93%),菌株zy-I与模式菌株Weissella cibaria(KACC11862T)的相似性仅为97.42%,推测为Weissella cibaria属中的潜在新种;16株活性菌株胞外代谢物对DPPH的抗氧化活性均大于胞内代谢物,且5株乳酸菌株(zy-4、zy-s6、YM-49、ZH-53、ZH-54)的胞外的DPPH清除能力均在45%以上,高于其它11株菌株。【结论】湛江海域动物肠道中存在较为丰富的抗氧化活性乳酸菌,并蕴藏潜在乳酸菌新种。

关键词(KeyWords)： 乳酸菌;筛选;抗氧化;多样性分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省科技计划项目(2016A020222014;2017A030303079)

作者(Author): 唐慧芳,张瀛,房志家,孙力军,刘颖

参考文献(References)：

• [1]VIRTANEN T,PIHLANTO A,AKKANEN S,et al.Development of antioxidant activity in milk whey during fermentation with lactic acid bacteria[J].Journal of Applied Microbiology,2007,102(1):106-115.
• [2]CHIN F L,TZU M P.In vitro effects of lactic acid bacteria on cancer cell viability and antioxidant activity[J].Journal of Food and Drug Analysis,2010,18(2):77-86.
• [3]熊双丽,卢飞,史敏娟,等.DPPH自由基清除活性评价方法在抗氧化剂筛选中的研究进展[J].食品工业科技,2012,33(8):380-383.
• [4]秦曼曼,张雪梅,王晓杰,等.产抗氧化活性物质的海洋放线菌筛选与鉴定[J].食品工业科技,2016,5(37):167-170.
• [5]邓元源,刘芸,刘欣,等.福建省腌菜中乳酸菌的分离与鉴定[J].食品安全质量检测学报,2018,9(3):481-490.
• [6]SHOBHARANI P,SACHINDRA N.Potential of marine lactic acid bacteria to ferment Sargassum sp.for enhanced anticoagulant and antioxidant properties[J].Journal of Applied Microbiology,2012,114(1):96-107.
• [7]吴祖芳,洪松虎,沈锡权,等.乳酸菌高抗氧化活性菌株的筛选及鉴定[J].中国食品学报2010,10(1):73-78.
• [8]代永刚,田志刚,南喜平.等.乳酸菌及其生理功能研究的进展[J].农产品加工,2009(7):24-26.
• [9]王悦齐,李来好,蔡秋杏,等.分离自腌干鱼的抗氧化发酵菌株的筛选及鉴定[J].南方水产科学,2016,12(3):74-83.
• [10]朱雯娟,安俊莹,张雪梅,等.梅香鱼发酵菌株的筛选及对品质的影响[J].食品科学,2015,36(23):162-166.
• [11]钟正丹,何义国,赵兴秀,等.白酒酒槽中抗氧化乳酸菌的筛选及培养基优化[J].2016,44(7):533-536.
• [12]张江魏,曹郁生.乳酸菌抗氧化活性的研究进展[J].中国乳品工业,2005,33(1):34-36.
• [13]TAKASHI K,MIHO K,MAKI N,et al.In vitro antioxidant and anti-inflammation properties of lactic acid bacteria isolated from fish intestines and fermented fish from the Sanriku Satoumi region in Japan[J].Food Research International,2014,(64):248-255.
• [14]黄玉军,刘冬,赵兰凤,等.6株人源乳酸菌体外抗氧化活性的比较[J].现代食品科技,2013,29(7):1518-1552.
• [15]BUDANAN R E,GIBBONR N E.伯杰细菌鉴定手册[M].8版.北京:科学出版社,1984:136-357.
• [16]凌代文.乳酸细菌分类鉴定及实验方法[M].北京:中国轻工业出版社,1999:1-129.
• [17]NUGENTR P,Krohn M A,HILLIER SL,et al.Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by a standardized method of gram stain interpretation[J].Journal of Clinical Microbiology,1991,29(2):297-301.
• [18]LU Q F,HU H Q,MO J,et al.Enhanced amplification of bacterial and fungal DNA using a new type of DNApolymerase[J].Australasian Plant Pathology,2012,41(6):661-663.
• [19]黄苛,张丽,刘祝祥,等.硇洲岛海胆可培养细菌的多样性[J].微生物学报,2009,49(11):1424-1429.
• [20]STACKBRANDT E,GOEBEL B M.Taxonomic note:a place for DNA-DNA reassociation and 16S rRNAsequence analysis in the present species definition in bacteriology[J].International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology,1994,44(4):846-849.
• [21]张凤敏,田丰伟,陈卫,等.具抗氧化活性乳酸菌的筛选[J].中国乳品工业,2007,35(2):4-7.
• [22]刘颖,时威,安俊莹,等.硇洲岛褐蓝子鱼肠道抗菌活性菌株的分离及多样性[J].微生物学报,2014,54(05):582-588.
• [23]李晓军,马跃英,龚红,等.具有抗氧化活性的乳酸菌菌株的筛选与鉴定[J].中国微生态学杂志,2018,30(6):663-668.
• [24]蔡英杰.第四届亚洲乳酸菌研讨会暨第三届乳酸菌与健康国际研讨会[R].上海:中国国际科技会议中心,2007.
• [25]兰道亮,王永,张诚民,等.藏绵羊肠道乳酸菌的分离鉴定及系统进化分析[J].西南民族大学学报,2014,40(04):481-484.(责任编辑:刘朏)