马氏珠母贝胚胎和早期幼虫冷冻的研究Study on Cryopreservation of Embryo and Early Larvae of Pinctada martensii
王鹏飞,王梅芳,余祥勇
摘要(Abstract):
0~4℃下,不同发育时期的马氏珠母贝(Pinctada martensii)胚胎和幼虫在不同浓度的DMSO抗冻保护液中放置30min后,置室温恢复,并以不同浓度的DMSO作为抗冻保护液,通过缓慢降温对不同发育时期的胚胎和早期幼虫进行超低温(-196℃)冷冻、35℃水浴快速解冻。结果表明:低温下DMSO对胚胎和早期幼虫活力影响较弱;马氏珠母贝的囊胚和担轮幼虫存活率较低。当DMSO体积分数为14%时,原肠胚的存活率为10%左右,且部分胚胎能够继续发育至D形幼虫;当DMSO体积分数为14%、16%时,解冻后的D形幼虫存活率超过49.9%,其中大部分存活48h以上。
关键词(KeyWords): 马氏珠母贝;胚胎;早期幼虫;超低温冷冻;存活率
基金项目(Foundation): 国家科技支撑计划项目2007BAD29B03;; 广东省科技计划项目2003C20330;; 广东海洋大学团队项目C06262
作者(Author): 王鹏飞,王梅芳,余祥勇
参考文献(References):
- [1]李广武,郑从义,唐兵.低温生物学[M].长沙:湖南科学出版社,1998:3-6;30-33;41-47.
- [2]梁飞龙.马氏珠母贝人工育苗水质控制技术的探讨[J].湛江海洋大学学报,1998,18(2):81-83.
- [3]王梅芳,余祥勇,刘永,等.马氏珠母贝杂交与自繁后代及企鹅珍珠贝间同工酶差异分析[J].农业生物技术学报,2005,13(6):777-782.
- [4]王梅芳,余祥勇,刘永,等.马氏珠母贝雌雄同体和自体受精的研究[J].水生生物学报,2006,30(4):420-424.
- [5]张岩,陈四清,于东祥,等.海洋贝类配子及胚胎的低温冷冻保存〔J〕.海洋水产研究,2004,25(6):73-78.
- [6]Nai-Hsien Chao,Ta Te Lin.Cryopreservation of late embryos and early larvae in the oyster and hard clam[J].Aquaculture1997,9(20):31-44.
- [7]薛钦昭.栉孔扇贝胚胎超低温液氮保存[J].海洋科学,1994,4:44-47.
- [8]王梅芳,余祥勇,刘永,等.马氏珠母贝精子的超低温保存[J].水产学报,2006,30(2):170-174.
- [9]金启增.珍珠贝种苗生物学[M].北京:海洋出版社,1992:26-31.
- [10]田永胜,陈松林,严安生,等.大菱鲆胚胎玻璃化方法研究[J].中国水产科学,2004,3(2):166-169.
- [11]朱仁华.海洋低温生物学[M].北京:海洋出版社,1984:70-102.
- [12]Giese A C.Cell physiology[M].5th ed.W.B.Saunders Company,1979:102-104.